生物技術(shù)中細(xì)胞培養(yǎng)是核心工藝，高水平的細(xì)胞培養(yǎng)依賴于高質(zhì)量的培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基的主要成份中，動物血清對細(xì)胞的生長繁殖發(fā)揮著重要作用。血清不僅富含多種蛋白、生長因子等細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成分，同時可提供貼壁因子、蛋白酶抑制劑等保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
在動物血清中牛血清的應(yīng)用最為廣泛，所以保證牛血清的質(zhì)量也是促進(jìn)生物制品質(zhì)量提高的重要環(huán)節(jié)。一般體外細(xì)胞培養(yǎng)的牛血清多采用胎牛血清、新生牛血清、小牛血清。
不同牛血清的來源：胎牛血清源自健康母牛體內(nèi)的胎牛，是通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清；新生牛血清從出生2周內(nèi)的新生牛靜脈取血獲取。小牛血清采自出生2周到1年內(nèi)的小牛靜脈取血；
牛血清成品的獲取
• 胎牛、新生牛、小牛的血液采集及儲存
• 原血全程冷鏈運(yùn)輸
• 原血冷凍離心，收集血清、凍存
• 血清使用前解凍、過濾
• 成品質(zhì)量檢測
血清使用前解凍
① 將血清從冷凍室移至2~8℃冰箱解凍，再放置室溫進(jìn)行徹底解凍，這樣可以避免溫度變化太大，造成蛋白析出；
?、?解凍時需不斷均勻搖晃，這樣操作可以使血清的溫度和成分均一，以減少絮狀沉淀物的生成；
?、?嚴(yán)禁將血清在37℃長時間孵育解凍，否則血清可能會產(chǎn)生沉淀&許多較不穩(wěn)定的成分也會受到破壞而影響血清品質(zhì)。
血清使用前過濾工藝
步驟1：粗血清大多數(shù)前處理會使用線繞濾芯或膜堆過濾去除粘性物質(zhì)；根據(jù)客戶工藝的不同，也會使用到濾袋、玻纖進(jìn)行過濾。
PP折疊濾芯
PES/PVDF膜濾芯
步驟2：一步0.45-1μm或2-3μm+0.45-1μm兩步預(yù)過濾，其作用是去除雜質(zhì)的同時保護(hù)后端膜過濾，比較常用的膜材質(zhì)是親水性PES或PVDF；
步驟3：0.22μm和0.1μm的除菌、除支原體過濾，確保成品無細(xì)菌、無支原體。
過濾工藝其他注意點(diǎn)有哪些？
1. 血清過濾開始時，濾速可以控制相對小一些，后逐步升至正常濾速，這樣可以延長濾芯的使用壽命；
2. 一般血清過濾前和過濾完成后，需對0.22μm/0.1μm過濾產(chǎn)品進(jìn)行完整性檢測。
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